OBJETIVO
Determinar
la concentración de los bacteriófagos por suspensión dentro de los medios de
plaquetas modificadas.
INTRODUCCIÓN
Los
agentes virales que atacan a las bacterias, normalmente son llamados
bacteriófagos (fagos). Son considerados una representación general natural de
los virus. Así son usados como modelos para entender la replicación viral en
las células hospederas-virus y su interacción. Ellos tienen una acción muy
específica, los bacteriófagos pueden actuar en un medio de bacterias, dentro de
una especie y de no atacar a otras en otros medios. La virulencia de los
bacteriófagos lisan la célula bacteriana, esto demuestra que en los medios de
cultivo, por medio de cultivos limpios o medios de agar o en zonas limpias de
plaquetas. Así los virus pueden ser usados en estudios epidemiológicos para
identificar medios específicos de bacterias.
Hay
otros fagos que llevan a cabo ese círculo lítico dentro de la célula, más bien
un ciclo lisogénico dentro de la célula hospedera, el ácido nucleico de los
fagos está incorporado dentro de la célula hospedera o dentro del cromosoma,
ahora lo llamaremos FAGOCITOSIS. Con esto la bacteria genera ocurrencia lítica o
no ocurre lisis en ese momento, así la temperatura de los fagos es muy
importante porque esto viene a ser responsable de la producción de difteria
tóxica, toxina botulínica y otras toxinas en la célula hospedera, asi los fagos
tienen una implicación en el desarrollo de antibióticos y su resistencia a las
bacterias. El segundo estilo de vida de los bacteriófagos está descrita en la
Figura 43.1
La
bacteria hospedera más común usado para trabajar con bacteriófagos es la Escherichia coli y se estudia un grupo de fagos alrededor de
lo que se llama las series T, numerados de 1 hasta 7, esto ataca a medio no móviles de E.coli. Son designados de T1, T2, T3…T7
(T por tipo).
Los
fagos T tienen una forma como de espermatozoide, con una cabeza polihídrica (más
o menos de 50µm de diámetro), y una
cola estrecha. Su cabeza es una línea sencilla de moléculas de ácidos nucleicos
alrededor de una estrecha capa de más o menos 50µm de largo, y considerado una doble hélice de cadena ADN.
El DNA está estrechamente condensado en la cabeza del fago está literalmente
emergido en unos tubos de proteínas y cerrado con un cierre contráctil. Un tipo de
bacteriófagos se pueden observar en la figura 43.2.
Un
círculo lítico se puede describir en la Figura 43.1, el fago se adhiere a la
pared celular de la bacteria con un receptor viral.
La
capa proteica del fago permanece fuera de la célula, sigue un
re-direccionamiento a la célula hospedera gracias al material del fago en lugar
de materia celular. Los nuevos fagos se replican dentro de la bacteria, rompen
la salud, salen las nuevas partículas del fago.
El
nuevo virón reinyecta y subsecuentemente rompe o lisa más celular. Esta
continúa siendo el ciclo de lisis reinfectantando o introduciendo visibles
plaquetas en las células.
Partes de Un bacterófago
REFERENCIAS
·
MICROBIOLOGY,
Chap.15. “Viruses: Morphology, Clasification, Replication”
·
MICROBIOLOGY,
Chap.16, “Viruses: Cultivation Methods, Pathogenicity”.
MATERIALES
·
2 platos Petri con agar
tripticasa y soya
·
10 tubos con 9ml cada
uno de caldo tripticasa
·
9 pipetas esteriles de
1ml (con algodón en la boquilla)
·
muestra del
bacteriófago de escherichia coli ajustado para tener un título de
aproximadamente 105 unidades
formadoras de placa (cfu) / ml
·
trypticase - cultivo en
caldo de 6 a 12 horas cepa sensible a bacteriófagos de E. coli.
PROCEDIMIENTO
Acomode 10
tubos de caldo de tripticasa por hilera en un tubo de ensayo, etiquételos del 1
al 10.
1.. Usando
una precaución aséptica, transfiera 1 ml de la muestra del fago al tubo.
Deseche el pippete, con una pipeta nueva mezcle las páginas y el caldo,
extrayendo aproximadamente 0.5 ml de la mintura.
2. coloque
una gota de E.coli en cada una de las dos placas de agar con tripticasa que se
proporcionan.
3.. invierta las placas, dibuje
cinco líneas en la parte inferior de cada una, y marque las líneas
numéricamente como se siembran debajo
4. Ahora
retire un bucle de material del tubo I y raya esto en la superficie de la placa
de agar que sigue
5. agregue
1 gota del cultivo de caldo Escheria coli a cada uno de los 10 tubos preparados
para 2 tubos preparados con este procedimiento. Incubar a 35°C.
